國內(nèi)外研究概況

　　菊花是菊科菊花屬多年生宿根草本植物，原產(chǎn)于我國。它花色繁多，品種豐富，具有很強(qiáng)的觀賞價值，是目前世界上栽培最廣的切花及盆花之一。它的繁殖可以用播種法、扦插法、分株法、組織培養(yǎng)法。在種苗生產(chǎn)上運(yùn)用最廣泛的方法是扦插和組培。由于菊花的病毒病種類比較多，而且危害也較為嚴(yán)重。使用扦插繁殖苗，容易引起病毒病的擴(kuò)張和蔓延，因此莖尖脫毒培養(yǎng)和組培快繁生產(chǎn)母本植株，再生產(chǎn)扦插苗的技術(shù)，對優(yōu)良品種的脫病毒和復(fù)壯有著重要意義。組培技術(shù)在新育成品種的快速繁殖上，應(yīng)用得更為廣泛。在種質(zhì)資源的保存和利用方面，用試管方法保存大量的育種材料和品種，為以后的育種工作提供各種材料，比在大田保種更容易和有利于節(jié)省土地和人力。國內(nèi)外對菊花的組織培養(yǎng)研究自1972年以來，有過不少報道，目前快速繁殖的技術(shù)已經(jīng)很成熟。但在脫毒、菊花花瓣育種和無糖培養(yǎng)方面的研究還在不斷深入。

　　有效的培養(yǎng)方法

　　1、培養(yǎng)基配方

　　誘導(dǎo)萌芽培養(yǎng)基：MS+BA 0.3mg/L+NAA 0.1mg/L

　　增殖培養(yǎng)基：MS+BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/l

　　生根培養(yǎng)基：1/2MS+NAA 0.1mg/L

　　2、培養(yǎng)程序

　　取材菊花能夠產(chǎn)生再生植株的器官很多，以組培快繁為目標(biāo)最好選莖尖、莖段、花蕾為外植體培養(yǎng)增殖效果最好。選取用扦插苗培育的無病蟲害、健壯的植株，在其上取材，可保持其優(yōu)良品種特性。在取材前2~3周，將入選株置于溫室內(nèi)培養(yǎng)，不要對葉面噴水，這樣能夠提高滅菌的成功率。接種前切取帶腋芽的莖段或未開的花蕾，這時花瓣外有一層薄膜包著，里面是無菌的。滅菌處理時莖尖的嫩葉不要剝得太干凈，以免傷口面暴露太大，使莖尖受到過大的損害。滅菌莖段除去葉片，只留一小段葉柄。材料初步切割后，用洗衣粉水漂洗三次，用自來水沖凈后，將其放入含有三滴吐溫的0.1%升汞溶液中消毒12min，并不時搖動，然后用鑷子將其夾入含三滴吐溫的8%次氯酸鈉溶液中浸泡8min（超凈工作臺上）并不時搖動。于無菌水中漂洗二次后待用。切割將莖切去1小段，這樣可減少滅菌藥物的毒害。切除莖尖上的幼葉；若是蕾須剝?nèi)セū�，露出里面半球形的花序軸，再視其大小縱切4~6塊，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中。生長及分化外植體經(jīng)培養(yǎng)后，一般20~40D莖尖處可分生出新芽，莖斷的葉腋處也會萌發(fā)出叢生芽，基部生長的愈傷組織也會分化出新芽。而花蕾外植體經(jīng)過 15~20D的培養(yǎng)，會形成愈傷組織；再經(jīng)過20~30D的培養(yǎng)，愈傷組織就會分化出較多的叢生芽。將從以上外植體誘導(dǎo)分化出的叢生芽，分切成數(shù)塊放入增殖培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)。開始分化率和分化苗的數(shù)量都較小，隨繼代次數(shù)增加，分生苗很快就能夠增多起來。增殖的方式除誘導(dǎo)叢生芽增殖外，還可用莖切段作微型扦插來繁殖，它的增殖速度也完全能滿足快速繁殖的要求。方法是用各種再生途徑產(chǎn)生的嫩莖為材料，培養(yǎng)其長到一定高度時，把它切成節(jié)段，一般是一葉為一段，然后將切斷的基部插入增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)。28D天后，腋芽即可長成新的小植株，重復(fù)上述的方法不斷進(jìn)行繼代培養(yǎng)，從而達(dá)到快繁殖目的。生根培養(yǎng)在繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)25~30D進(jìn)行轉(zhuǎn)瓶時，將那些生長正常，苗高達(dá)到2~3CM的單株嫩莖切下，插到生根培養(yǎng)基中，7D后可形成有突起的淡綠色根原基，經(jīng)過2周培養(yǎng)后，即可生根。菊花的生根非常容易，在多種生長素濃度下，乃至不加任何生長素的培養(yǎng)基上，都可以獲得100%的生根效果。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及調(diào)控技術(shù)

　　菊花出瓶苗的標(biāo)準(zhǔn)時葉色濃綠，粗壯，苗高2~3CM，有根且根系發(fā)達(dá)。經(jīng)過渡培養(yǎng)的下地苗，則要求小苗葉色正常，濃綠，植株矮壯。

　　菊花是一種比較容易進(jìn)行組織培養(yǎng)的植物，適用于菊花的培養(yǎng)基種類很多，它對激素的要求不很嚴(yán)格，適應(yīng)范圍較廣，菊花在組織培養(yǎng)中是一種較不容易因為激素濃度的高低而引起變異或玻璃化的一個種類。但是BA含量不應(yīng)超過10mg/L，NAA不應(yīng)超過2mg/L。菊花繼代苗的植株應(yīng)達(dá)到葉形、株形正常，增殖培養(yǎng)率可達(dá)到5~10倍以上。

　　菊花在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的溫度適應(yīng)范圍較寬，在22~28℃都可以。但溫度過低，會使苗質(zhì)脆弱，生長速度延緩；溫度過高培養(yǎng)基水分蒸發(fā)較快，致使植株還未分化到所需程度，就開始出現(xiàn)干萎。所以溫度最好在24~26℃之間。培養(yǎng)室光照每天12h，光照在1000~4000lx都可以生長，但是光照過弱會使幼苗出現(xiàn)徒長現(xiàn)象，莖軟葉細(xì)弱，低質(zhì)量的組培苗，出瓶后的過渡成活率也低。因此光照以2500~3000lx為宜。用來生根的單株嫩莖必須有1~2CM 高，在生根培養(yǎng)基上生長15D后，苗高才能達(dá)到2~3 CM，有2~3條根長達(dá)1~2CM的不定根。最好生根率達(dá)100%后，才可出瓶煉苗。如若還有少部分植株未長出足夠的根系時，可將瓶苗在上述環(huán)境培養(yǎng)條件下延緩幾日，待其長出根系時再出瓶。

　　出瓶苗的過渡管理

　　菊花的有根苗移栽成活容易，將有根的植株從瓶中用鑷子輕輕夾出，洗凈根部黏附的瓊脂，栽入珍珠巖基質(zhì)中。移栽前期將空氣濕度保持在75%~85%之間，遮光率為40%，環(huán)境溫度控制在20~26℃，就可使試管苗在20D左右移栽成活，并長出新根新葉。經(jīng)1~2個月的管理，便可定植于富含腐殖質(zhì)，經(jīng)過滅菌處理的砂質(zhì)壤土中。菊花喜歡微潮偏干的土壤環(huán)境，在定植時不必施用基肥，隨著小苗對外界環(huán)境的適應(yīng)，可每隔1~2周追稀液體肥料一次。由于菊花有忌高溫、喜涼爽的習(xí)性，菊花試管苗定植后，不可接受過強(qiáng)的日光照射，應(yīng)該采用先遮蔭再逐漸增加光照的管理方法。由于菊花的過渡成活率比較高，所以有時也可以從瓶內(nèi)出來就直接下地栽培，但管理呀非常細(xì)心。