鐵線蕨（Adiantum capillus-veneris）

　　材料類別:莖尖。

　　培養(yǎng)條件

    （1）愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+6-BA2.0mg?L-1(單位下同)；（2）愈傷組織繼代增殖培養(yǎng)基：MS+6-BA1.0；（3）愈傷組織分化培養(yǎng)基：1/2MS+6-BA0.5；（4）再生植株壯苗培養(yǎng)基：1/2MS+6-BA0.1；（5）生根培養(yǎng)基：1/2MS+NAA0.5。以上培養(yǎng)基均含蔗糖30 g?L-1、瓊脂0.7%，PH5.5~5.8。培養(yǎng)溫度（25±2）℃，光照度1500~2000lx，光照12h?d-1。

　　生長與分化情況

　　1 無菌材料的獲得

    取鐵線蕨盆栽植株土中冒出尚未能展開形成葉的幼嫩莖尖為外植體，用自來水洗凈后，在超凈工作臺上用75%酒精浸泡30 s，再用0.1%升汞浸泡3 min，無菌水沖洗3次。第二次用0.1%升汞浸泡2min，無菌水沖洗5次。將表面消毒的外植體莖尖接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。

　　2 愈傷組織誘導(dǎo)與增殖

    莖尖在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在光照條件下，經(jīng)60d培養(yǎng)，開始出現(xiàn)綠色細小晶體狀愈傷組織。繼續(xù)培養(yǎng)10d后，將誘導(dǎo)分化出的愈傷組織轉(zhuǎn)到愈傷組織繼代增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，生成的愈傷組織結(jié)構(gòu)致密，生長速度較緩慢。初期每60d繼代1次，每繼代1次愈傷組織塊體積擴大約1倍。隨著繼代代數(shù)的增加，增殖速度逐漸加快，愈傷組織的顏色也由綠色轉(zhuǎn)為墨綠色。繼代5代后，愈傷組織體積增殖1倍，平均時間縮短為45d左右。

　　3 愈傷組織分化

    取繼代后的愈傷組織塊接種到愈傷組織分化培養(yǎng)基上，在同樣條件下培養(yǎng)，30d后在愈傷組織塊上逐漸長出灰綠色的絲狀體，繼續(xù)培養(yǎng)后形成綠色細長叢生狀絲狀體。切取叢生狀絲狀體轉(zhuǎn)到再生植株壯苗培養(yǎng)基上，10d后絲狀體慢慢長出莖和小葉，形成叢生小苗。

　　4 生根與移栽

    將分化出莖、葉的叢生小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)30d可生根出瓶，生根率達100%。在廣州地區(qū)，鐵線蕨的出瓶宜選擇天氣涼爽的10月份至翌年4月份。此時氣溫介于10~30℃之間，移栽成活率高。夏季高溫對鐵線蕨的生長有一定的影響。鐵線蕨瓶苗出瓶可不經(jīng)煉苗，直接從培養(yǎng)瓶中取出生根苗，洗凈附著的培養(yǎng)基，用椰糠種植。種植前先將椰糠用水澆透，小苗種好后再澆透定根水，放在覆蓋有95%遮陽網(wǎng)的塑料大棚內(nèi)養(yǎng)護。定植初期，注意噴霧保濕。1周后小苗可定根生長。成活率95%以上。2周后可用0.1%的尿素水肥結(jié)合給小苗施肥，每周1次，養(yǎng)護1個半月可上盆種植。

　　意義與進展

    鐵線蕨姿態(tài)文靜、幽雅、株形、葉形優(yōu)美，是蕨類植物中最具有觀賞價值的小型室內(nèi)盆栽植物，深受人們的喜愛。傳統(tǒng)的繁殖方法主要以分株繁殖為主，繁殖速度慢，根莖易老化，造成植株過高，退化，觀賞價值下降。用組織培養(yǎng)技術(shù)可極大的提高繁殖系數(shù)，恢復(fù)品種觀賞特性，是一條值得考慮的途徑。以鐵線蕨幼嫩莖尖誘導(dǎo)愈傷組織和植株再生尚未見報道。